Центр коллективного пользования

Красноярского научного центра СО РАН

Аминокислотный анализатор Hitachi LA8080

Назначение прибора

Предназначен для определения состава и количественного содержания аминокислот в гидролизатах биологических образцов либо в физиологических жидкостях.

Основные технические характеристики прибора

Программируемый ход анализа. Основные блоки: автосамплер, система градиентной подачи элюентов и нингидринового реагента, насосы, термостат с предколонкой и колонкой с катионообменной смолой, реактор для получения нингидриновых производных, спектрофотометрический детектор, управляющий компьютер. Температура колонки 20-70 °С; температура реактора 135 °С; рабочее давление 7-9 МПа; поток элюента 0.2-0.3 мл/мин; измерительный канал 1 с длиной волны 440 нм, канал 2 с длиной волны 570 нм. Предел детектирования 2.5 пМоль (S/N =2, по аспарагину), воспроизводимость результатов (по глицину и гистидину) < 1.0% СКО.

Области применения прибора

Аминокислоты присутствуют во всех биологических образцах, и часто в среде их обитания, поскольку являются структурными единицами белков, определяющими их свойства и функции. Одновременное определение всех аминокислот, присутствующих в объекте, затруднено из-за их разнородной химической структуры и наличия мешающих веществ в матрице. Ионообменная хроматография с последующей специфической реакцией аминокислот с нингидрином и спектрофотометрическое детектирование полученных окрашенных производных – классический и наиболее надежный способ для определения массовых долей биогенных кислот в образцах. Для определения количественного содержания на единицу массы/объема применяется градуировка по методу внешнего стандарта при хроматографировании смеси известного аминокислотного состава в разных концентрациях.

Пример. Определение состава и содержания аминокислот в рыбных кормах и ингредиентах, используемых для изготовления кормов для аквакультуры. Пример результатов анализа индивидуального образца, с видом хроматограммы, расчетов программы обработки по калибровочной зависимости, полученной в ходе при хроматографировании стандартной смеси аминокислот.

Пример. Содержание (наномоль на анализируемую пробу) индивидуальных аминокислот в стандарте и партии рыбных кормов.

Пример. Обзор содержания анминокислот в природных водных биообъектах: микроводорослях и беспозвоночных.

Требования к образцам исследования

Образцы биомассы, почвы либо грунта, или иного объекта должны быть сухие, мелко измельчены, массой от 10 мг до 100 мг. Допускается хранение образцов в таком виде до 3 месяцев перед анализом. Лаборатория располагает возможностью выполнить основные этапы пробоподготовки образцов при анализе гидролизатов белков, а именно – кислотный гидролиз, удаление кислоты и последующее высушивание образца. В случае если заказчик выполняет этап пробоподготовки самостоятельно, образцы предоставляются на анализ в виде сухого остатка, содержащего аминокислоты.

Время, необходимое на одно измерение

время для пробоподготовки сухих первичных проб (до 5 образцов одновременно): 48 часов.

время для пробоподготовки готовых гидролизатов (до 5 образцов одновременно): 3 часа.

предельное время установления рабочего режима прибора: 2 часа.

время непрерывной работы прибора: 24 часа.

характерное время на одну хроматограмму прибора: 3 часа.

время, необходимое для выполнения расчетов по хроматограмме: 1 час.

время исполнения заказа: в зависимости от количества и состояния образцов. Например, результаты для 10 образцов сухой биомассы, с учетом времени на пробоподготовку, могут быть выданы через 10 рабочих дней.

сколько времени прибор работает на договорной основе (сторонние организации): 30 % времени.

Расходные материалы

Наименование материалов и реактивов: пробоподготовка - соляная кислота, фильтры шприцевые с мембраной 0.45 мкм типа ПВДФ либо ацетилцеллюлозы, картриджи для твердофазной экстракции типа CHROMAFIX C4; хроматографирование – готовые элюенты и 2-х компонентные нингидриновые растворы фирмы Hitachi, а именно 5 типов элюентов, чистый этанол; ионообменная колонка #2622 80*4.6 мм и предколонка для подавления аммонийного пика (амортизация); раствор стандартной смеси чистых аминокислот (Sigma, Pickering или эквивалент).

Форматы данных, выдаваемых прибором

файл в формате Эксел, содержащий примеры хроматограмм и таблицу со значениями всех идентифицированных аминокислот, мг/г сухой массы образца либо мг на пробу.

Процедура подачи образца на измерения

Электронная заявка через сайт

Услуги и их стоимость

стоимость расходных материалов на одно измерение: 2800.00 руб.

стоимость одного измерения, включая расходные материалы: 4800.00 руб.

способ оплаты: заключение договора на выполнение научно-исследовательских работ или оказания услуг.

Контактная информация

Место расположения прибора:	ул. Академгородок, д. 50, стр. 50, каб. 2-02, Институт биофизики СО РАН, Лаборатория экспериментальной гидроэкологии
Ответственный за прибор	Сущик Надежда Николаевна, зам. директора ИБФ СО РАН по научной работе.
Заявки принимает	Сущик Н.Н р.т. (391) 249 5253 e-mail:labehe@ibp.ru